印跡法(blotting)又稱轉(zhuǎn)移電泳,是一種將待分離物質(zhì)轉(zhuǎn)移到固相支持物(如硝酸纖維素膜或PVDF膜等)上,經(jīng)過(guò)與相應(yīng)探針作用的一種新方法。1975年,Southern創(chuàng)造了將DNA區(qū)帶原位轉(zhuǎn)移到硝酸基纖維素膜(NC膜)上,再進(jìn)行雜交的方法,被稱為Southe...[繼續(xù)閱讀]

    毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis,CE)又稱高效毛細(xì)管電泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一類以毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力的新型液相分離技術(shù)。毛細(xì)管電泳實(shí)際上包含電泳、色譜及其交叉內(nèi)容,它使分析化學(xué)...[繼續(xù)閱讀]

    瓊脂糖凝膠電泳(agraose gel electrophoresis,AGE)是用瓊脂糖作為支持物的一種電泳方法,主要用于研究核酸等生物大分子物質(zhì)。一、原理利用瓊脂糖電泳分離和分析核酸的基本原理是電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)(分離小分子物質(zhì)時(shí)無(wú)此效應(yīng))。當(dāng)...[繼續(xù)閱讀]

    利用光作用于物質(zhì)后所產(chǎn)生的發(fā)射光、吸收光、散射光等光譜學(xué)特性能夠?qū)ξ镔|(zhì)進(jìn)行定性、定量的分析,這一技術(shù)常被稱為光學(xué)光譜分析法。隨著光學(xué)、數(shù)學(xué)、電子學(xué)、計(jì)算機(jī)軟硬件技術(shù)的發(fā)展,該方法越來(lái)越多地被應(yīng)用于化學(xué)、生物...[繼續(xù)閱讀]

    可見(jiàn)光的波長(zhǎng)范圍是從360nm(紫色)到760nm(紅色),范圍在200～360nm的光是近紫外光,研究物質(zhì)在紫外-可見(jiàn)光區(qū)吸收光譜的分析方法稱為紫外-可見(jiàn)光吸收光譜法(ultraviolet and visible absorption spectrometry),也稱為紫外-可見(jiàn)光光度法(ultraviolet and ...[繼續(xù)閱讀]

    一、熒光的產(chǎn)生如前所述,物質(zhì)吸收光量子能量后被激發(fā),從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài),處于激發(fā)態(tài)的分子不穩(wěn)定,可通過(guò)多種途徑釋放多余的能量返回基態(tài),發(fā)射熒光是其中的一種途徑。物質(zhì)從激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)回到基態(tài)時(shí)所發(fā)射出的光稱...[繼續(xù)閱讀]

    DNA重組技術(shù)是在分子水平對(duì)基因進(jìn)行體外操作,因而也稱為分子克隆(molecular cloning)或基因克隆。所謂克隆是指通過(guò)無(wú)性繁殖過(guò)程所產(chǎn)生的與親代完全相同的子代群體;而分子克隆是指在體外對(duì)DNA分子按照既定的目的和方案進(jìn)行人工重...[繼續(xù)閱讀]

    常見(jiàn)的分子克隆中所需的基因片段制備方法包括通過(guò)基因組文庫(kù)分離、篩選基因,cDNA文庫(kù)分離、篩選基因,人工合成基因和應(yīng)用PCR獲取目的基因等。一、通過(guò)基因組文庫(kù)分離、篩選基因基因組文庫(kù)(genomic library)是指用基因克隆的方法保...[繼續(xù)閱讀]

    所謂載體(vector)是指能在連接酶作用下和外源DNA片段或基因連接,并運(yùn)送DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子。目前用于分子克隆的載體種類繁多,包括在大腸桿菌中使用的質(zhì)粒(pBR322、pUC18/pUC19)、噬菌體載體(λ噬菌體、M13)、酵母人工染色體...[繼續(xù)閱讀]

    DNA分子的體外重組是DNA分子之間的連接過(guò)程。這是一個(gè)DNA連接酶催化的生物化學(xué)反應(yīng),目前幾種常用的DNA分子連接方法有:1. 黏性末端連接法(cohesive end ligation)這種方法適用于插入片段和載體分子具有相同的黏性末端(cohesive end),相同的...[繼續(xù)閱讀]