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流式細(xì)胞術(shù) 共有 106 個(gè)詞條內(nèi)容

二、DNA/RNA染料/CD34-PE/CD45-PC5+定量熒光微球檢測(cè)

    DNA/RNA染料在FL1中檢測(cè),用來(lái)識(shí)別所有有核細(xì)胞,在流式細(xì)胞儀分析時(shí)作為圈定白細(xì)胞的基礎(chǔ)。采用標(biāo)準(zhǔn)ISHAGE方法進(jìn)行CD34-PE/CD45-PC5+染色分析,絕對(duì)定量微球BD機(jī)器在FL4通道內(nèi)檢測(cè),Coulter機(jī)器可在FL3通道內(nèi)檢測(cè)。(一)樣本準(zhǔn)備(1)驗(yàn)證移液器...[繼續(xù)閱讀]

流式細(xì)胞術(shù)

三、CD34+計(jì)數(shù)的質(zhì)量控制

    在CD34計(jì)數(shù)檢測(cè)中有眾多因素影響著計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。這些因素可通過(guò)以下操作步驟來(lái)去除這些影響:①盡量減少對(duì)樣本處理步驟;②使用適當(dāng)標(biāo)記的抗體;③選擇適當(dāng)?shù)年幮院完?yáng)性對(duì)照標(biāo)本;④收集足夠的細(xì)胞數(shù)來(lái)降低變異系數(shù);⑤采用標(biāo)...[繼續(xù)閱讀]

流式細(xì)胞術(shù)

一、標(biāo)本的收集、保存和處理

    分型標(biāo)本可用EDTAK2或K3或不含防腐劑肝素抗凝后的外周血或骨髓。不同抗凝劑的選擇視實(shí)驗(yàn)不同需要而定。如肝素抗凝的標(biāo)本適宜用來(lái)做遺傳學(xué)分析,而用EDTA抗凝的標(biāo)本則可保持細(xì)胞較好的形態(tài)。胸水或腦積液等標(biāo)本無(wú)須抗凝。對(duì)于...[繼續(xù)閱讀]

流式細(xì)胞術(shù)

二、單克隆抗體的選擇

    (一)急性白血病免疫分型單標(biāo)記抗體的選擇用流式細(xì)胞儀檢測(cè)常用的單克隆抗體均為異硫氰酸熒光素(FITC)、藻紅蛋白(PE)及PerCP標(biāo)記的直標(biāo)抗體。B淋巴系統(tǒng)單抗有CD10、CD19、CD20、CD22等;T淋巴系統(tǒng)單抗有CD2、CD3、CD5、CD7等;粒細(xì)胞系統(tǒng)...[繼續(xù)閱讀]

流式細(xì)胞術(shù)

三、免疫表型的分析程序

    (一)細(xì)胞表面抗原檢測(cè)的染色方案(1)取20單克隆抗體與100μl抗凝血,共同混合置室溫20min;(2)加溶血素1500μl,置室溫避光15min,2500r/min離心5min;(3)棄上清,加1500μlPBS,混勻,2500r/min離心5min;(4)同上操作1次,上儀器檢測(cè):以CD45-PerCP/SSC設(shè)門,觀察每群...[繼續(xù)閱讀]

流式細(xì)胞術(shù)

四、儀器分析與結(jié)果判斷

    標(biāo)本經(jīng)CD45熒光單抗標(biāo)記后,在SSC與CD45圖中可將白細(xì)胞與血小板及紅細(xì)胞碎片相區(qū)分,此時(shí)就可設(shè)門選定細(xì)胞分析。在分析表達(dá)很弱的抗原(如CD34)時(shí),為了獲得一個(gè)準(zhǔn)確的結(jié)果,對(duì)CD45陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目是有要求的。然而對(duì)CD45陽(yáng)性細(xì)胞的具體數(shù)...[繼續(xù)閱讀]

流式細(xì)胞術(shù)

五、流式細(xì)胞術(shù)在白血病免疫分型中的臨床應(yīng)用

    用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行白血病免疫分型,其抗體組合的多少要根據(jù)分析目的和對(duì)疾病所表達(dá)的特異性標(biāo)記來(lái)確定。如果檢測(cè)的目的僅為得出論斷結(jié)論,則只需要選用急性淋巴細(xì)胞白血病或與慢性淋巴細(xì)胞白血病相關(guān)特異性抗體組合便可診斷...[繼續(xù)閱讀]

流式細(xì)胞術(shù)

六、流式細(xì)胞術(shù)用于白血病免疫分型中的注意事項(xiàng)

    (1)如檢測(cè)標(biāo)本內(nèi)混有正常細(xì)胞和異常細(xì)胞,結(jié)果解釋需結(jié)合臨床指征和細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)。在報(bào)告細(xì)胞標(biāo)志物結(jié)果時(shí),應(yīng)考慮到有許多免疫標(biāo)志物并非有嚴(yán)格的細(xì)胞系別特異性。如CD7雖是T細(xì)胞系的標(biāo)志物,但它也能在一部分的AML病例中表...[繼續(xù)閱讀]

流式細(xì)胞術(shù)

七、白血病微小殘留病的檢測(cè)

    白血病微小殘留病(minimalresidualdiseases,MRD),是指在白血病經(jīng)誘導(dǎo)化療獲完全緩解后或是骨髓移植治療后,體內(nèi)仍殘留有少量白血病細(xì)胞的狀態(tài)。用一般形態(tài)學(xué)的方法已難以檢出白血病細(xì)胞的存在。這些殘存的細(xì)胞可能成為白血病復(fù)發(fā)的...[繼續(xù)閱讀]

流式細(xì)胞術(shù)

一、細(xì)胞表面分子的定量分析

    傳統(tǒng)的流式細(xì)胞分析方法僅提供了關(guān)于細(xì)胞表達(dá)抗原頻率的信息,通過(guò)檢測(cè)多個(gè)細(xì)胞,可以很容易地計(jì)算不同細(xì)胞群的含量,通常報(bào)告設(shè)門內(nèi)的陽(yáng)性或陰性細(xì)胞的百分含量。如使用已知體積和含量的參考微球,還可以報(bào)告細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)和...[繼續(xù)閱讀]

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