在受到凋亡誘導后,線粒體膜電位(mitochondrialmembranepotential,MMP)會發(fā)生變化,導致膜穿透性的改變。有些染料可檢測線粒體MMP的變化。其中常用的陽離子綠色熒光染料羅丹明123(rhodamine123,Rh123)可在正?；罴毎木€粒體內聚集。當細胞MMP降...[繼續(xù)閱讀]

    TdT介導的dUTP缺口末端標記法(TdTmediated-dUTPnickendlabelling,TUNEL)是1992年Gavricli等首先報道,它實際上是分子生物學與形態(tài)學相結合的研究方法,對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,能準確地反映細胞凋亡最典型的生物化學和形...[繼續(xù)閱讀]

    細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上可發(fā)生一系列特征性改變,包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態(tài)的改變等。由于核的改變造成各種熒光染料對凋亡細胞的DNA可染性發(fā)生改變,細胞凋亡時,核酸內切...[繼續(xù)閱讀]

    (1)Fas/FasL(Fas配體):Fas抗原與Fas配體的交聯(lián)是淋巴細胞誘導靶細胞凋亡所必需的途徑,它們的異常與免疫相關疾病、腫瘤、移植物排斥、病毒性肝炎、腎小球腎炎等多種疾病高度相關。(2)p53:p53是細胞周期中的“檢查點”分子,其控制著細...[繼續(xù)閱讀]

    全血法熒光單標記可檢測血小板CD62p、CD63、CD42b、CD41、CD61等指標。具體染色方法步驟如下:(1)采血用枸櫞酸鹽或EDTA抗凝;(2)10μl熒光標記抗體,加100μlPBS,再加5μl全血(樣品管);10μl抗體同型對照,加100μlPBS,再加5μl全血(對照管);輕輕混勻...[繼續(xù)閱讀]

    血小板RNA含量與血小板生成狀態(tài)相關,他可以區(qū)分是因為骨髓抑制或外周血破壞增加引起的血小板減少。在化療后或移植后,網織血小板可以監(jiān)測巨核細胞和血小板生成狀態(tài)。(一)網織血小板檢測原理噻唑橙(thiazolorange,TO)是一種親脂性...[繼續(xù)閱讀]

    一種能夠通過胎盤、存在于血小板表面的免疫球蛋白,被稱為血小板相關抗體(PA-IgG)。PA-IgG包括3種成分:①真正的抗血小板抗體;②循環(huán)免疫復合物;③非特異性吸附于血小板表面的血漿免疫球蛋白。已經確認,PA-IgG和原發(fā)性血小板減少性...[繼續(xù)閱讀]

    活化血小板表面會出現(xiàn)一些新的標記。主要的有兩個:PAC-1(活化的Ⅱb/Ⅲa)和CD62p(P-selectin),它們是對臨床有用的活化血小板標記。此外還有CD31(PECAM)和CD63(lysosomalantigen)兩個活化標記,并已在臨床應用。血小板活化研究的全血標本收集要...[繼續(xù)閱讀]

    (一)抗體的選擇選擇CDWorkshop中的單克隆抗體。單克隆抗體反應特異性高,非特異性結合少,但由于血小板富含F(xiàn)cRⅡ(CD32,FcⅡ受體),而Fc受體對不同抗體亞類具有不同親和力,所以在亞類選擇上,對于人的抗體以選擇IgG1為好。(二)抗凝劑的選...[繼續(xù)閱讀]

    (一)“米蘭”方案第一個廣泛應用的干細胞計數(shù)方案是由IstitutoNazionaleTumoriinMilan的Siena等人創(chuàng)立的米蘭方案(MilanProtocol)。在此方案中,需準備3管50μl的血樣或白細胞采集物樣本(如白細胞計數(shù)小于150μl,如受者樣本,則樣本和抗體均需加倍...[繼續(xù)閱讀]