顯微注射是指在顯微鏡下,通過毛細注射針,將外源基因或其它物質(zhì)導(dǎo)入生物細胞的過程。早期顯微注射僅限于將外源物質(zhì)注入體積較大的卵細胞或受精細胞,其中將基因?qū)胧芫巡⑹怪l(fā)育成個體的過程稱為轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)。儀器...[繼續(xù)閱讀]

    核基質(zhì)——中間纖維的整裝電鏡制樣技術(shù)細胞骨架與核骨架是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種細胞內(nèi)特殊細胞器。大量的研究表明,細胞骨架與細胞運動、分裂、分化等關(guān)系密切;而核骨架與細胞內(nèi)DNA的復(fù)制、RNA的轉(zhuǎn)錄,乃至基因表達調(diào)控等重要...[繼續(xù)閱讀]

    一、一般技術(shù)(一)液體配制1.PBS配方1:...[繼續(xù)閱讀]

    一、非酶分離細胞方法(一)機械分離法　適用于較柔軟的組織,如腦、肝、脾、淋巴結(jié)、胸腺、胚胎組織、腫瘤組織等。1.組織研磨法:操作方法:(1)取消毒的碟皿(直徑5～8cm或略大),放入少許Hanks液或PBS;(2)將采取的小塊組織先用PBS漂洗去...[繼續(xù)閱讀]

    肝臟灌流分離肝細胞可以獲得大量肝細胞,而且存活率高,分離所需時間短,是實驗動物肝細胞分離的較好方法。操作程序:1.大鼠或小鼠用乙醚或2%戊巴比妥(腹腔注射60mg/kg體重)麻醉,浸入75%酒精3～5秒,使全身毛皮浸濕,剝離皮膚,將動物固...[繼續(xù)閱讀]

    細胞淘洗法(elutration)首先由P·E·Lindahl于1948年報道,他利用這種裝置分離了真核細胞、精子細胞、酵母細胞、艾氏腹水細胞等。直到1973年,Beckman公司生產(chǎn)了JE-6型離心轉(zhuǎn)頭后,這種分離系統(tǒng)才廣泛地被應(yīng)用。它適用于單個細胞懸液,也適...[繼續(xù)閱讀]

    由于細胞表面均帶有多少不等的電荷,因此在電場中就會向一定的方向泳動,泳動的速度與電荷的多少相關(guān)。絕大多數(shù)的細胞在生理性pH條件下,其表面帶有負電荷。不同種類的細胞帶負電荷的密度不同,因此在電場中移動的速度也不相...[繼續(xù)閱讀]

    一、什么是細胞通訊　　器官和組織的細胞與細胞之間存在的細胞膜通道連接結(jié)構(gòu),稱為間隙連接(gapjunctions)。間隙連接廣泛存在于動物組織細胞中,是相鄰細胞間直接交流細胞質(zhì)內(nèi)的信息分子或離子進行通訊的途徑。間隙連接介導(dǎo)的...[繼續(xù)閱讀]

    一、基本原理間隙連接通道的內(nèi)徑約為1.5nm,只能允許離子和分子量小于或等于1000道爾頓的分子通過。信號分子和離子在細胞間流動的方向受化學(xué)濃度級差的驅(qū)動。據(jù)此,檢查細胞通訊的方法主要有以下3種,即電偶聯(lián)、細胞代謝協(xié)同和...[繼續(xù)閱讀]

    一、抗腫瘤藥物研究多數(shù)腫瘤細胞通訊減弱或消失,促進間隙連接通訊的藥物,如cAMP、維甲酸、鈣調(diào)蛋白拮抗劑等能抑制腫瘤細胞增殖與其對細胞通訊的促進或改善作用相關(guān)。可將藥物促進通訊缺陷的腫瘤細胞恢復(fù)連接通訊的作用,作...[繼續(xù)閱讀]