滇重樓甾體糖基轉(zhuǎn)移酶的克隆及功能表征

摘要： 該研究從滇重樓中克隆得到糖基轉(zhuǎn)移酶基因PpUGT2,該基因ORF長度為1 773 bp,編碼蛋白質(zhì)的氨基酸為590個。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析顯示，該糖基轉(zhuǎn)移酶歸為UGT80A亞家族，經(jīng)國際糖基轉(zhuǎn)移酶命名委員會命名為UGT80A49。構(gòu)建原核表達(dá)載體pET28a-PpUGT2,通過誘導(dǎo)蛋白表達(dá)及蛋白提取，進(jìn)行體外酶促實(shí)驗，以UDP-葡萄糖為糖基供體，薯蕷皂素和偏諾皂素為底物，鑒定了其具有...